瑞氏染色法

(1)瑞氏染料的组成将适量的碱性亚甲蓝与酸性伊红溶于甲醇中。甲醇的作用,一是溶解亚甲蓝和伊红,二是固定细胞形态。
(2)瑞氏染色的原理既有物理吸附作用,又有化学亲和作用。各种细胞成分化学性质不同,会被染成不同颜色。
(3)影响因素染色深浅与染液pH(最适pH为6.4-6.8)、细胞数量、血膜厚度、染色时间、染液浓度有关,偏酸性环境易与伊红结合,使红细胞、嗜酸粒细胞染色偏红,细胞核呈淡蓝色或不染色,偏碱性环境易与亚甲蓝结合,使细胞染色呈灰蓝色,嗜酸性颗粒呈暗褐色或棕黑色,中性颗粒偏粗呈紫黑色。

吉姆萨染色法

(1)吉姆萨染料的组成
吉姆萨染料由天青、伊红、甲醇和纯甘油组成。甘油的作用是防止甲醇挥发。
(2)吉姆萨染色的原理既有物理吸附作用,又有化学亲和作用。各种细胞成分化学性质不同,会被染成不同颜色。
(3)血涂片需先用甲醇固定3-5min;吉姆萨染液染色前,用磷酸盐缓冲液(pH6.4-6.8)稀释吉姆萨染料10-20倍;浸染10-30min。

方法学评价

瑞氏染色是最常用的细胞染色方法,尤其对细胞质成分、中性颗粒染色效果好,但对细胞核的着色能力略差。吉姆萨染液对细胞核、寄生虫(如疟原虫等)着色较好,但对细胞质成分的着色能力略差。采用瑞氏-吉姆萨复合染液可使细胞胞质、颗粒、细胞核等均获得满意的染色效果。

质量控制

血细胞染色过深或过浅与血涂片中细胞数量、血膜厚度、染色时间、染液浓度、PH密切相关。染色过深时纠正的方法是缩短染色时间、稀释染液、调节pH;染色过浅纠正方法是延长染色时间、调节pH。